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血液生化分析(Blood biochemistry analysis)

服務簡述：以儀器分析檢體中的生理生化數值，包含一般肝、腎、心等指數分析，並提供血球分析。  

服務種類 (詳細項目見表)：

(1)動物實驗：代抽血(心臟採血)、組織採檢與固定。

(2)血清生化分析：檢測動物實驗中，藥物是否會對實驗動物的器官造成損傷，如肝指數分析(AST、ALT、rGT、TBIL、DBIL、TP、ALB)、腎指數分析(BUN、CREA、UA)、心臟損傷指數分析(LDH、CK-MB、Troponin-I)。

(3)代謝相關血清生化分析：檢測GLU、TG、TC、LDL-c、HDL-c。

(4)全血、肺泡沖提液之CBC分析。含RBC、HCT、HGB、MCV、RDW、MCH、MCHC、PLT、RETIC、MPV、PDW、WBC等。

(5)金屬離子分析(鈉、鉀、氯、鈣、鎂、磷、鐵)

(6)其他血液中特殊項目或指標。

使用材料

(1)一般生化分析以微量離心管、紅頭管或黃頭管收取。

(2)全血分析以含EDTA抗凝劑之紫頭管收取。(採血管可自行提供或與優服生技購買)

交件時間：

約3天至一週。

檢體種類：

(1)血清或血漿(視檢測標的需做調整)。

(2)肺泡沖提液。

(3)全血。

(4)尿液。

(5)其他特殊檢體。

檢體量：

(1) 血液生化檢測中，實驗機器因injector與detector有一小段空間，故每次實驗的Dead volumn為100 ul起算，每增加一項目，增加10 ul體積。

(2) 240 ul的血清可檢測大部分生化數值，除離子、CK-MB、Troponin I 以外，這些項目需要較大的體積或進行稀釋(500 ul)。

(3) CBC分析當中，肺泡沖提液或全血只需提供180 ul即可檢測所有血球相關的分析項目。

服務流程：

(1)專人討論實驗流程，確認檢測項目、檢體類型、收件方式、前測試以及報價。

(2)先支付材料費或整體案件50%之訂金。

(3)執行上機前之品管，未過者不予以上機且不計費。

(4)執行實驗。

(5)出具報告(計算好濃度之報告)

(6)支付尾款、結案。

常見QA：

1.我該如何選擇採血管？

Ans：視項目而定。

(1)若為一般肝、腎、心指數分析，以微量離心管、紅頭管或黃頭管收取凝血後的serum。

(2)若為全血進行CBC分析，應以含EDTA抗凝劑之紫頭管收取。(雖綠頭管也含有heparin抗凝劑，但heparin可能造成血球變形)

(3)若欲偵測血糖，應以灰頭管收取血液，避免血球繼續消耗檢體中的glucose。

(4)若欲做凝血相關分析，應以淺藍頭管進行收取。

2.如何解決血清溶血之情況？

Ans：

(1)首先須排除檢體不當保存之情形，過去有遇過因收案時間較長，研究者在採血後並未做血清或血漿的分離，將全血直接送入-80 ℃的溫層保存，未分離的血球破裂後造成嚴重溶血，干擾生化數值的結果(如AST、ALT)。

(2)動物個體之影響，瘦弱、生病的實驗動物之血液品質通常較差，若是執行高血脂實驗之動物個體，溶血程度也較控制組嚴重。

(3)採血時所使用的針具粗細、是否有不當採血的情形發生(如抽血後未拔針頭即將血液排入採血管，或採血時過於暴力等)

3.如何解決收取全血時容易凝血之情況？

Ans：因囓齒動物凝血的速度極快，故：

(1)採血後應立即將全血與採血管中的抗凝劑均勻混和，不可直接靜置或vortex。

(2)採血之位置會有影響，可改以心臟或下腔靜脈的位置採血。

(3)麻醉劑使用亦有影響，舒泰較isoflurane不易凝血(客戶反饋)。

(4)抽血用的針具先以抗凝劑Rinse。

4.溶血的程度以及造成的影響？

Ans：一般可接受的溶血程度為3+以下，Frank等人1978年的研究顯示不同程度溶血對於某些生化數值會造成影響。

Fig.1 .溶血程度之參考(Frank et al., 1978)。

Fig.2 .溶血情況下不同生化數質的變化(Frank et al., 1978)。

影響較明顯者：AST (GOT)、LDH、α-hydroxybutyrate dehydrogenase、creatine kinase、Total bilirubin等。

5.凝血造成的影響？

Ans：一般在執行實驗前會進行品管，若有凝血的血塊產生，將不進行上機，機器會有塞管的可能，且PLT、PDW、MPV血小板相關數值將嚴重降低，使數據無參考意義。

6.各項目的縮寫與代稱？

7.各數值的參考區間？

Ans：

(1) CBC相關數值可參照下圖之結果。

Fig. 3. 整理自https://researchanimalresources.jhu.edu/wp-content/uploads/2017/09/2017JHPhenoCoreCBCmice.pdf

的參考數據。

8.為何測出來的結果與參考區間有落差？

Ans：此為常發生之現象，血液生化數值在不同品系的鼠種間會有所差異，甚至同品系在國內不同的來源上也會有所落差，同品系、同來源的鼠種當中，性別、週齡、健康狀況也會對血液生化數值的浮動有所影響。理想的方式還是每次實驗中設計同樣性別、同樣週齡的對照組，並增加每個組別的N值。

Fig.4 .在不同的鼠種中以高脂飼料誘導HFD，其血液生化數值的差異(Li et al., 2020)。

不同來源的鼠種的基礎值、誘導後的反應都有可能不同，須特別留意。

9.實驗檢體不夠怎麼辦？

Ans：小鼠的血量通常很少，抽取出來的血清通常很難每隻都取到250 ul～300 ul以上的血清。

(1)血液量與週齡、體重、性別、以及健康狀況有關，雄性血液量通常較多，體重較重者血液量也較多。

(2)有些血液生化數值在我們的經驗中，稀釋5倍至10倍時，回乘後仍能接近線性，可與我們實驗人員討論，一旦決定稀釋再進行實驗，也建議日後實驗維持同樣倍率執行。
(3)採用微流道設計之套組，但通常單價會較高。

10.檢體中出現高脂血(lipemia)的現象？

Ans：Lipemia的判定標準為：

1+： TG 500 mg/dL（約200-500mg/dL）

2+： TG 1000 mg/dL （約500-1000 mg/dL）

3+ ：TG 1500 mg/dL以上

超過 3+以上的乳糜血中，因乳糜微粒過多，影響儀器檢測吸光值，會對大多數的血液生化數值造成干擾，而AST、Mg、TP的數值在2+以上的乳糜血中就會受到干擾，故在檢驗報告上會對乳糜血的程度進行標記。

11.可否使用人用的採血管收取動物的檢體呢？

Ans：建議視最終能夠採取的血量做決定，成人常用的採血管規格為9～10 ml，小兒的採血管多為4～5 ml，大鼠若血量較多，可以與人用的共用，但小鼠血量較少，應買0.5 ml體積的採血管，避免抗凝劑與血液比例失衡，會影響到數值的準確性！

Reference

Frank, J. J., Bermes, E. W., Bickel, M. J., & Watkins, B. F. (1978). Effect of in vitro hemolysis on chemical values for serum. Clinical chemistry, 24(11), 1966-1970.        

Li, J., Wu, H., Liu, Y., & Yang, L. (2020). High fat diet induced obesity model using four strains of mice: Kunming, C57BL/6, BALB/c and ICR. Experimental animals, 19-0148.