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Cluster of differentiation marker (CD marker)為免疫細胞膜上的蛋白質，有的可作為receptor或ligand，有的具有黏附功能、或進行細胞訊息傳遞。除此之外，我們也可以透過細胞表面的CD marker去分辨他的特性、功能，如大部分白血球細胞，會表現CD45這個CD marker，T細胞會表現CD3指標、B細胞則會表現CD19指標(Zola et al., 2007)。

講到如何挑選流式細胞儀抗體以及染劑，首先需要知道有兩大重點，第一是研究者想要看甚麼？以及單位中硬體設備的限制。

今天若目標明確，要看外周血當中NK細胞的數量與比例，便會需要對代表NK細胞的marker進行染色，如CD16、CD56以及CD3；若想看T細胞與B細胞的分型，便需染CD45、CD3、CD19、CD4、CD8這幾個surface marker；若想區分細胞的死活，則會選擇一系列相關的核酸染劑(如PI、DAPI、7-AAD等)

 啟動細胞內的自毀按鈕

    當體內的細胞累積突變造成生理機能失控時，體內會啟動一連串的訊息傳遞路徑，讓這些不正常的細胞自然的死亡，這個過程叫做細胞程序性死亡，或稱細胞凋亡(apoptosis)，細胞凋亡除了發生在清除老化、突變等異常的細胞外，在發育的過程中也扮演重要的腳色，比如說為了讓手掌的五根手指分開，就必須讓某些細胞凋亡，避免手指黏在一起，這是體內再正常不過的生理機制。

Extracellular vesicles (EVs)係指細胞外排，大小介於30 nm～1000 nm的顆粒，其中比較常被探討的組成為microvesicles以及exosome，他們的幾個主要差別包含，mcirocesicles的大小通常在150 nm～1000 nm之間；exosome的大小通常在30～150 nm之間，除此之外，外排的機制也有所不同，microvesicles通常是透過出芽的方式(bud)離開細胞，而exosome則會在細胞內部形成(multivescular bodys) MVB小體，再藉由MVB小體與細胞膜融合後將exosome排出。

我們知道，癌細胞具有不死且不斷增生的能力，其中細胞週期失控為一重要原因。正常細胞在生長分裂時，受到許多轉錄調節因子以及各種蛋白質的精密調控，當這些調節因子或是蛋白質突變、不正常表現時(如p53、CDK4、CDK6等)，細胞將會永無止境的不斷分裂下去，進而變成腫瘤(Kastan & Bartek, 2004; Malumbres & Barbacid, 2009)。

在了解流式細胞儀的光學概念之前，我們要先談談光，光是一種以電磁波的能量，從我們肉眼可見的可見光外，包含紫外光、r射線、紅外光、微波等，都屬於電磁波。電磁波含有三個參數：波速、波長、頻率，波速=波長X頻率，電磁波波速=光速，且於真空中速度固定的情況下，波長與頻率就會成反比，波長越長者，頻率越低；波長越短者，頻率越高。

介紹完流式細胞儀中常用的幾種圖形後，接著介紹圖形的圈選策略(gating strategy) 通常我們在看paper的時候，流式細胞儀只呈現最後一張圖，也就是最終Data的結果，但，最後一張圖的結果是怎麼得出來的呢?

了解流式細胞儀的基礎原理以及可以執行的實驗項目後，接著跟大家分享該如何判讀流式細胞儀的圖形？

流式細胞儀基礎之介紹(一)

流式細胞儀是甚麼?