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 免疫組織染色(Immunohistochemistry)

 

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Cluster of differentiation marker (CD marker)為免疫細胞膜上的蛋白質,有的可作為receptorligand,有的具有黏附功能、或進行細胞訊息傳遞。除此之外,我們也可以透過細胞表面的CD marker去分辨他的特性、功能,如大部分白血球細胞,會表現CD45這個CD markerT細胞會表現CD3指標、B細胞則會表現CD19指標(Zola et al., 2007)

 

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講到如何挑選流式細胞儀抗體以及染劑,首先需要知道有兩大重點,第一是研究者想要看甚麼?以及單位中硬體設備的限制。

今天若目標明確,要看外周血當中NK細胞的數量與比例,便會需要對代表NK細胞的marker進行染色,如CD16CD56以及CD3;若想看T細胞與B細胞的分型,便需染CD45CD3CD19CD4CD8這幾個surface marker;若想區分細胞的死活,則會選擇一系列相關的核酸染劑(PIDAPI7-AAD)

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黴漿菌是目前發現最小,且可自行複製的病原體,黴漿菌的大小介於0.150.3 μm之間,有機會通過實驗室中過濾使用的小飛碟(0.22 um孔徑),其基因組的大小為0.58–2.20 Mb 與大腸桿菌的 4.64 Mb要小的很多(Rottem et al., 2012)。黴漿菌並非黴菌,在分類學上被歸類為細菌,但與一般常見的細菌不同,因黴漿菌不具有細胞壁,在細胞培養中常添加的抗生素penicillin對其無效,除此之外,因黴漿菌缺乏一些代謝相關的酵素,無法執行TCA循環,必須依附其他生物細胞才可生存。

在各種黴漿菌中,M. oraleM. argininiM. hyorinisM. fermentansA. laidlawiiM. hominis,為較常見的汙染菌種,其汙染源可能來自於實驗室內共用的mediumPBSpipettman、操作人員(Fig.2.)等,如M. fermentansM. hominis便存在於人的口腔、呼吸道中,甚至是培養液中添加的Fetal bovin serum (FBS)血清製劑,都可能一開始就含有這些黴漿菌(FBSM. argininiA. laidlawii較為常見),豬來源的Trypsin也常有M. hyorinis的汙染(Nikfarjam & Farzaneh, 2012)

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